1、用于裸鼠皮下成瘤的细胞系有哪些？

研究中用于裸鼠皮下成瘤的细胞分为人源细胞系和鼠源细胞系，经过验证发现：
容易成瘤的细胞包括：A431(人表皮癌细胞)，A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞），MCF-7（人乳腺癌），SKBR3(人乳腺腺癌细胞)，KB（人口腔表皮样癌细胞），Hep-G2（人肝癌细胞），NCI-H460(大细胞肺癌)，TU212（人喉癌细胞），SK-OV-3（人卵巢癌细胞），SGC7901（人胃肿瘤细胞）；
成瘤比较慢的细胞包括：A549（人肺癌细胞），BEL-7402（人肝癌细胞），BGC-823（人胃癌细胞），CT26 （小鼠结肠癌细胞），CNE（人鼻咽癌细胞），HT-29（人结肠癌细胞），MDA-MB-231 （人乳腺癌），PC-3（人前列腺癌细胞），SPC-A-1（人肺腺癌细胞），U251（人胶质瘤细胞）。

2、裸鼠皮下成瘤对细胞的数量和状态有什么要求？

选取无支原体等污染的对数期细胞、细胞活率在大于85%，用PBS或者无血清培养基将细胞浓度调成1-5 X107个/mL，每只小鼠接种0.1-0.2 mL。

3、裸鼠皮下成瘤实验对小鼠有什么要求吗？

选择没有胸腺等免疫器官的裸鼠、NOD-Scid和NCG等，鼠龄为4-6周、体重16-18g，肿瘤细胞系种植部位选择血供丰富区域，如腋窝中后部等。

4、裸鼠接种肿瘤细胞后，多长时间可以观察到肿瘤的生长和转移？

皮下成瘤实验通常情况下1-2周会成瘤，最长成瘤时间不超过4周，建议细胞接种后，每天观察裸鼠的健康状况和行为表现，待观察到肿瘤后，采用卡尺定期记录肿瘤的体积大小（V肿瘤=，其中a为长轴，b为短轴）。

5、小鼠的瘤子长起来又消失的原因？

肿瘤块先变大，后缩小很常见，原因可能是炎症反应，导致肿瘤细胞被⼩⿏⾃⾝吸收，继续观察肿瘤细胞吸收之后是否经过⼏周还能长出来，长不起来建议考虑更换小⿏。

6、是否可以在⼀只小鼠进⾏多个不同的点接种？

不建议，⼀只老鼠推荐只接种⼀个点，因为⼀只小鼠⾝上有多个肿瘤块的情况下，可能会相互影响。

7、肿瘤长不出来的原因有哪些？

1）肿瘤生长周期很慢，1周开始生长肿块，⼤约需要1—2个⽉才能长成肿瘤；2）可能是细胞状态差，活⼒不好，或是肿瘤细胞不易成瘤，需加⼊基质胶辅助(基质胶：PBS=1:1)或增⼤接种量或更换细胞系；3）⼀⽅⾯可能是⼩⿏周龄太大，或小鼠免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更⼤的小鼠（Nod-scid小鼠，NOG小鼠）；4）饲养环境，环境影响动物状态，状态差的鼠容易发生死亡，不易成瘤。

8、皮下或皮内肿瘤生长迅速，或生长到一定的大小后出现溃疡和坏死现象？

考虑小动物感染原因造成，可对小动物提供支持治疗预防感染的抗生素，可在小动物饮用水中施用抗生素（和其他药物）原因如下：

1）药物在水中的稳定性。

2）小鼠喝水得以治疗。

若小动物全身出现坏死和溃疡作为皮下或皮内自然生长模式的一部分肿瘤，长度低于1.5cm，导致皮肤破裂或渗出（液体或血液积聚）持续超过48-72小时而不闭合“伤口”通常需要对小动物进行安乐死处理。

9、肿瘤体积相差⼤，大小不一的原因？

⾸先，并不是所有的肿瘤都能够长成均⼀的形态；其次，可能跟⼩⿏周龄及接种细胞量不⼀致导致，建议重新接种。
10、小鼠接种细胞后，饲养条件应该注意什么？

免疫缺陷小鼠对饲养环境的要求很高，必须饲养在SPF级环境内，减少不必要的应激刺激，并且接种细胞的小鼠需要与免疫正常小鼠饲养在不同房间等。

文章出自：验外实包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/